Dalam 2 dekade terakhir, antibodi monoklonal menjadi harapan baru dalam bidang riset dan terapi berbagai macam penyakit. Kebutuhan antibodi untuk berbagai macam aplikasi menyebabkan permintaan pasar meningkat dan berujung kebutuhan kenaikan sistem produksi. Bioreaktor tradisional sering kali tidak dapat memenuhi kebutuhan pasar. Oleh karena itu, kami memperkenalkan sistem produksi yang cepat, fleksibel, dan memproduksi hasil yang tinggi baik saat perbanyakan sel hibridoma maupun produksi antibodi dalam Nunc Roller Bottle.
Mengacu dari dokumen Thermo Fischer (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BPD/Application-Notes/high-yield-antibody-production-petg-roller-bottles-app-note.pdf) dengan menggunakan sel hibridoma TIB-105 dimulai dari 1 flask T-80 dapat dikembangkan hingga 1juta sel/mL dalam 18 hari dan dapat menghasilkan ±18 gram antibodi dalam 21-24 hari. Densitas optimum untuk proses subkultur sel hibridoma adalah 100.000 sel/mL dengan volume total medium yang digunakan di T-80 adalah 300 mL. Waktu optimum untuk harvest sel adalah hari ke 8 (puncak densitas) tetapi untuk produksi antibodi disarankan pada hari ke 11 dan bertahan hingga hari ke 17. Dalam 1 Nunc Roller Bottles dapat memproduksi antara 163.2 hingga 184.3 mg antibodi.
Gambar 1. Kurva pertumbuhan dan produksi antibodi TIB-105. Sel ditumbuhkan dalam Roller bottle dengan 800 mL Medium.
Dengan menggunakan Nunc Roller Bottle, sel hibridoma dari 1 roller bottle dapat menjadi seeder 10 roller bottle dengan inkubasi 5 hari. Fitur ini memudahkan user untuk scaling up yield produksi dan cepat. Setelah melakukan 3 kali subkultur atau perbanyakan, 100 Roller bottle dapat digunakan dan memproduksi hingga 1011 sel hibridoma dalam 18 hari dan memproduksi hingga 18 gram antibodi dalam 21 hari.
Nunc Roller Bottle merupakan vessel yang didesain untuk produksi skala medium dengan ukuran luas permukaan tumbuh lebih luas daripada T-Flask dan Erlenmeyer. Keistimewaan lain adalah are pertumbuhan pada Nunc roller bottle memanfaatkan seluruh luas permukaan, tidak hanya dasar vessel saja. Selain itu, sel yang ditumbuhkan dalam Nunc Roller Bottle akan membutuhkan lebih sedikit medium tetapi densitas lebih tinggi dengan memanfaatkan rotasi dan effisien penggunaan media. Roller bottle termasuk sistem dinamik yang umumnya menghasilkan densitas sel per area permukaan lebih tinggi serta lebih banyak titer dibandingkan sistem static atau tradisional.
Nunc Roller bottle memiliki 2 pilihan material yaitu PS dan PETG. PETG Roller bottle dirancang untuk area produksi skala industry dikarenakan material PETG bisa disimpan dalam suhu –40°C. Sedangkan, PS Roller Bottle merupakan gold standar material untuk produksi kultur sel dan telah memiliki sertifikasi nonpyrogenic. PETG dan PS Roller bottle telah diberikan sterilisasi radiasi gamma dan memiliki sterilitas level (SAL) 10-6.
Gambar 2. Proses kultur sel dan proses produksi antibodi
Sel Hibridoma ditumbuhkan ke dalam roller bottle dengan konsentrasi awal (1 x 105 sel/mL) dalam 300 mL medium di Nunc Roller Bottle. Setelah 4 hari inkubasi ditambahkan kembal 500 mL medium steril sehingga total volume 800 mL/Roller bottle. Untuk proses produksi antibodi dapat menunggu hingga hari ke 8 untuk dilakukan panen antibody (gambar 3.). Pada hasil analisa Thermo ditunjukkan roller bottle mendapatkan hasil optimum pada hari ke 8. Antibodi dipanen lebih cepat dibandingkan dengan menggunakan Erlenmeyer dan Flask. Pada Erlenmeyer membutuhkan waktu 11 hari untuk mendapatkan konsentrasi yang sama.
Gambar 3. Perbandingan produksi antibody (ug/mL)
Roller Bottle memiliki 2 pilihan permukaan tumbuh, Smooth design dan pleated design. Baik PETG Roller bottle maupun PS Roller bottle tersedia opsi tersebut. Pada smooth design, memiliki luas permukaan 850 cm2 (PS Roller Bottle) dan 1050 cm2 (PETG Roller Bottle). Pleated Design dapat memberikan hingga 75% permukaan pertumbuhan yang lebih luas dibandingkan Smooth design tapi memiliki ukuran dimensi yang sama.
Catalog
Related Product
http://elokarsa.com/product/nunc-roller-bottle/
http://elokarsa.com/product/immunoassay-plates-elisa-plates/
http://elokarsa.com/product/nunc-easyflask-cell-culture-flasks/
